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病理组织脱水机使用技巧

时间：2024-12-02 15:57

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病理脱水机是一种专门用于病理组织脱水的设备，它通过一系列化学试剂的置换，将组织中的水分去除，以便后续的染色和显微镜检查。

步骤	试剂及时间
1	10%的甲醛液2小时
2	80%的乙醇3小时
3	95%的乙醇（Ⅰ）2小时
4	95%的乙醇（Ⅱ）1小时
5	无水乙醇（Ⅰ）1小时
6	无水乙醇（Ⅱ）1小时
7	无水乙醇+丙酮（4:1）0.5小时
8	二甲苯（Ⅰ）0.5小时
9	二甲苯（Ⅱ）0.5小时
10	石蜡（Ⅰ）1小时
11	石蜡（Ⅱ）1小时
12	石蜡（Ⅲ）1小时
13	包埋

使用技巧

在使用病理脱水机时，有一些技巧可以帮助提高工作效率和脱水质量：

1. 组织固定：组织在进入80%的乙醇前应在10%的甲醛液固定不少于2小时。

2. 试剂更换：根据实验室的具体情况，可能需要定期更换脱水试剂，以保证脱水效果。

3. 组织大小：不同的组织大小可能需要不同的脱水程序，例如小标本（如肾穿、肝穿等）可能需要更短的脱水时间。

4. 安全性：在操作过程中，需要注意安全，比如穿戴适当的防护装备，避免接触有害化学试剂。

组织样本处理

1.1 脱水：

脱水的目的在于将固定后组织内的水分逐渐置换出来，利于透明剂和石蜡的渗入。

脱水剂的种类可以分为非石蜡溶剂脱水剂和石蜡溶剂脱水剂，前者脱水后必须经过透明剂透明方可浸蜡，后者在脱水后可直接浸蜡。目前病理实验室常用的脱水剂为乙醇，属于非石蜡溶剂脱水剂，乙醇作为脱水剂的优点在于其与水的‘相似相溶原理’对梯度配比兼容性高且成本相对较低也更安全，利用浓度差可将组织水分置换出来，且多梯度乙醇脱水可以在迅速脱水的基础上较好的保持组织形态，利于透明和浸蜡更好地进行。

1.2 透明：

在乙醇脱水后的组织，需经过一种既与乙醇结合又与石蜡结合的溶剂作为媒介使石蜡浸入组织，这种溶剂会使组织呈现出不同程度的透明状态，过将这个过程称为透明。

目前病理实验室最常用的透明剂为二甲苯，一种无色透明但有刺激性味道的液体，二甲苯使用不当会让组织收缩变脆，因此二甲苯透明的时间在组织处理过程中也十分重要。

1.3 浸蜡：

浸蜡的目的是置换组织中的透明剂，石蜡渗入组织后，经冷冻使组织变硬为蜡块，利于切成薄片称为石蜡切片。

目前病理实验室通常使用熔点为58~60℃的石蜡将组织浸蜡，在密闭式全自动脱水剂中通常也会设置加压来加速浸蜡时间。

需要注意的是：在脱水之前需对脱水机进行程序设定：

前面也提到目前病理实验室都会选择用全封闭式全自动脱水机，而全自动脱水机使用过程中最重要的环节就是脱水程序的设置。

通常可以通过组织大小将脱水程序设置为大样本脱水程序和小样本脱水程序。大样本脱水程序时间长，小样本脱水程序时间短。

小样本脱水程序的梯度乙醇（70%、80%、90%和无水乙醇）脱水时间通常为常温每缸40 min~1 h、二甲苯透明时间通常为常温每缸30 min~40 min、石蜡浸蜡时间通常为每缸1 h，温度设置为高于石蜡熔点2℃左右。

大样本脱水程序的梯度乙醇（70%、80%、90%和无水乙醇）脱水时间通常为常温每缸1 h~1.5 h、二甲苯透明时间通常为常温每缸40 min~50 min、石蜡浸蜡时间通常为每缸1.5 h，温度设置为高于石蜡熔点2℃左右。

另外，脱水机需定期进行换液：

全自动脱水机需要定期换液，换液周期通常根据处理组织样本的数量决定，具体的换液方式也都根据不同病理实验室的实际情况而决定：可以全部换新也可以将第一缸试剂废弃，后缸前移然后补充最后一缸新试剂。